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如何进行CCK8实验?——详细步骤解析

来源:www.expandeo.net 时间:2024-06-10 14:38:41 作者:争先步骤网 浏览: [手机版]

CCK8实验是一种常用的细胞增殖和细胞检测方法争~先~步~骤~网。它基于细胞代谢活的变化来评估细胞的生长状态,广泛应用于细胞学、免疫学、生化学领域。本文将详细介绍CCK8实验的具体步骤

如何进行CCK8实验?——详细步骤解析(1)

一、实验前准备

  1.准备培养皿:96孔板、24孔板

  2.准备CCK8试剂和PBS缓冲液;

  3.准备待测细胞的培养基、PBS缓冲液、离心、移液、离心机实验器材;

  4.将CCK8试剂放置于室温下,免阳光直射争先步骤网www.expandeo.net

二、实验步骤

1.将细胞接种到培养皿中,培养至当的状态。

  2.将培养皿中的培养液抽取出来,用PBS缓冲液洗涤细胞3次,使细胞与培养液分离。

3.将PBS缓冲液吸去,加入CCK8试剂,使其与细胞接触争+先+步+骤+网

  4.将培养皿放入恒温培养箱中,保持37℃,5% CO2,培养1-4小时。

  5.取出培养皿,用多功能酶标仪或显微镜观察细胞的颜变化。CCK8试剂会代谢成水溶的紫产物,代表细胞的生长状态争先步骤网。细胞生长得越好,产生的紫产物就越多。

6.据实验需要,可以进行定量检测。将培养皿中的液体吸出,用多功能酶标仪或分光光度计检测吸光度值,计算出细胞的代谢活争先步骤网

三、实验注意事项

1.实验前应检查CCK8试剂是否过期,保证试剂的有效

  2.尽量免在实验过程中将CCK8试剂暴露于阳光下,以免影响实验结果;

  3.在加入CCK8试剂时,要保证试剂充分与细胞接触,免产生误差;

  4.在实验过程中,应格控制温度和CO2浓度,保证实验结果的准确

5.在实验前,应对待测细胞进行预处理,以保证实验结果的可靠

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